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    免疫细胞化学染色方法

    发布时间:2017-4-25 14:25:27

    1、细胞标本置于载玻片上;
    2、固定:建议使用95%乙醇或10%中性缓冲福尔马林固定液固定10分钟;
    3、稍水洗,载玻片上加1%Triton X-100试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
    4、根据第一抗体的要求,对细胞进行相应的抗原修复;
    5、如有必要,每张载玻片上加过氧化物酶阻断试剂,室温下孵育10分钟,PBS冲洗3x3分钟;
    6、除去PBS,载玻片上加第一抗体,室温下孵育60分钟或4℃过夜,PBS冲洗3x3分钟;
    7、除去PBS,载玻片上加检测试剂盒(按照试剂盒说明书进行操作),PBS冲洗3x3分钟;
    8、除去PBS,根据检测试剂盒选择相应的显色系统,最后中性树胶封固。

    备注:更好的方法是顺利获得离心或直接收集将细胞聚拢,再用蛋清或琼脂包裹后形成细胞块进行固定、脱水、包埋、切片,再按照免疫组化染色步骤进行操作。